1例疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎的免疫缺陷患者持续排出疫苗衍生脊髓灰质炎病毒

目的研究中国首例疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎(VAPP)的免疫缺陷患者持续排出的免疫缺陷疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(iVDPV)的分子生物学特征,并分析持续排毒对中国维持无脊灰状态的影响。方法对分离于该患儿12份粪便标本的12株Ⅱ型iVDPV和5株Ⅲ型iVDPV毒株使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增VP1区基因片段,然后对扩增产物进行核苷酸序列测定与分析,并使用生物信息学的方法分析了毒株核苷酸序列之间的同源关系以及相关性。结果在间隔145d的时间里采集了6次双份粪便标本,除了第1次采集的双份粪便标本中未分离到Ⅲ型脊灰病毒外,Ⅱ型和Ⅲ型iVDPVs连续在粪便标本中分离到。12株Ⅱ型脊灰病毒主序列中的变异位点基本是随机分布在VP1基因上的,与SabinⅡ型相比,变异率为0.86%~2.55%;诸多核苷酸位点的变异大多是同义突变,主序列编码的氨基酸与SabinⅡ型相比共引起8个氨基酸位点突变,其中第103位和143位是12条主序列的共同变异位点,显示它们的主序列是相关的,并且都是来源于SabinⅡ型疫苗株的。尤其是nt 2 909位点(U→C)变异,导致Ile143突变为Thr143,是一个已知的与神经毒力回复野生型相关的位点。与标准SabinⅢ型相比,5株Ⅲ型脊灰病毒序列同源性非常高,并且核苷酸突变几乎是均匀地分布在整个VP1基因上的,变异率为2.56%~2.78%,毒株序列都是来源于SabinⅢ型疫苗株,氨基酸共出现10个突变位点,其中9个为它们所共享,显示了非常高的相关性。结论Ⅱ型iVDPV以居群的形式存在,主序列之间有相关性,Ⅲ型iVDPV序列有高度的相关性,但与Ⅱ型的居群形式不一样,可以看出Ⅲ型疫苗株病毒适应人体肠道进行复制并获得较高传播性的能力比Ⅱ型要差。中国首例iVDPV在分子病毒学上与已知循环的疫苗衍生脊灰病毒(cVDPVs)无本质上的差别,存在着iVDPVs与cVDPVs相互转变的潜在可能性。维持较高的口服脊灰减毒活疫苗(OPV)免疫覆盖率,是阻止脊灰野病毒输入和防止VDPVs发生人际间传播的关键。另外,保持急性弛缓性麻痹病例监测系统和脊灰实验室网络具有较高的敏感性,重新评估现在的OPV免疫策略,在全球证实消灭脊灰野病毒后适时制订停止OPV免疫的策略,都是降低这种潜在危险的重要手段。

酶联免疫吸附试验筛查疫苗衍生脊髓灰质炎病毒的效果评价

目的评价和分析酶联免疫吸附试验(ELISA)在脊髓灰质炎(脊灰)病毒型内鉴别(Intratypic differentiation,ITD)中的应用,及其在疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived polioviruses,VDPVs)筛查中的敏感性和重要性。方法使用ELISA型内鉴定方法对2004年所有省级疾病预防控制中心脊灰实验室送检的单型脊灰病毒进行型内鉴定,然后对结果为非疫苗类似株(Non Sabin-like,NSL)或者双反应毒株(Double reactive virus,DRV)进行VP1区基因序列测定和分析。结果2004年606株单型脊灰病毒中,有576株被鉴定为疫苗类似株(Sabin-like,SL),11株为NSL,全部是Ⅰ型;17株为DRV,2株为无反应株(Non-reactive virus,NRV)。通过对ELISA结果为NSL、DRV或NRV的毒株进行全VP1区核苷酸序列测定和分析,检测出9株Ⅰ型VDPVs和1株Ⅱ型VDPV。结论ELISA进行型内鉴定的优势在于它最敏感的筛选指标是VP1区核苷酸变异率为1%,即它可以有效地区分脊灰疫苗病毒相关株和其它毒株,包括VDPV(核苷酸变异率≥1%,但<15%)和脊灰野病毒(核苷酸变异率≥15%),因此对VDPV的筛查具有较强的优势。

中国急性弛缓性麻痹病例脊髓灰质炎疫苗病毒分离株中优势株的基因特征及形成原因浅析

目的研究从中国1996~2002年急性弛缓性麻痹(AFP)病例的粪便标本中分离到的脊髓灰质炎(脊灰)疫苗病毒中优势株的基因特征,以及分析优势株形成的原因,从而为中国维持无脊灰状态、疫苗免疫策略的转变提供科学依据。方法对1996~2002年省级疾病预防控制中心(CDC)脊灰实验室送检的所有脊灰病毒分离株,通过统计学方法确定优势株,然后使用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法对优势株进行型内鉴定。型内鉴定显示与疫苗病毒有差异者,进行VP1区基因核苷酸序列的测定和分析。结果中国1996~2002年从AFP病例中分离的脊灰疫苗病毒Ⅱ型比Ⅰ型和Ⅲ型多,差异有显著的统计学意义,是优势病毒株。在Ⅱ型脊灰病毒中,PCR-RFLP型内鉴定方法检测出Ⅱ型疫苗变异脊灰病毒70株,ELISA型内鉴定方法检测出Ⅱ型双反应(DRV)株13株,全部排除脊灰野病毒。在总计82株Ⅱ型变异脊灰病毒中(1株病毒既是疫苗变异株、也是DRV株),nt2909位点是个突变热点(69/83,83.1%),其中14株变化形式为T2909A,54株变化形式为T2909C,1株变化形式为T2909G;4株Ⅱ型疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)被鉴定出来,其在VP1区的抗原性与Sabin株相比并无大的差别。结论中国1996~2002年从AFP病例中分离的脊灰病毒中,Ⅱ型脊灰病毒一直是优势株,但Ⅱ型病毒在VP1区抗原性以及核苷酸序列上与Ⅱ型疫苗病毒相比,并无很大改变。因此,Ⅱ型病毒成为优势株的原因应该在于Ⅱ型病毒本身的一些特性,例如在Ⅱ型疫苗病毒基因组中决定减毒的位点比Ⅰ型疫苗病毒少,以及Ⅱ型脊灰疫苗病毒在人体肠道内复制的时间比Ⅰ型疫苗病毒长等。这是中国Ⅰ型脊灰疫苗病毒比Ⅱ型脊灰疫苗病毒少的两个重要原因。但Ⅱ型脊灰疫苗病毒显著多于Ⅲ型脊灰疫苗病毒的原因尚需进一步深入研究。

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸质量评价

目的分析实施国家批签发前后三价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(TOPV)的质量及存在问题,评价TOPV的质量。方法通过资料审查和实验室检定,对2002~2004年TOPV检定结果作统计和质量趋势分析。同时将1997~2004年检定的TOPV结果进行了比较。结果共对320批TOPV批记录摘要进行资料审查,其中85批进行实验室检定,结果符合规定。在《中国生物制品规程》(2000年版)及国家批签发实施后,TOPV质量有了明显提高。结论近年来中国TOPV质量稳定。实施国家批签发对TOPV的生产和管理起到规范及监督作用,促进了疫苗质量的提高,但尚存在一些问题。

湖南省2001～2005年急性弛缓性麻痹病例病毒学监测结果分析

目的评价湖南省2001~2005年急性弛缓性麻痹(AFP)病例病毒学监测情况,巩固无脊髓灰质炎(脊灰)成果。方法收集<15岁AFP病例粪便标本,采用世界卫生组织规定方法进行肠道病毒(EV)分离与鉴定,脊灰病毒阳性株送中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室进行型内鉴别。结果5年共检测1 103例AFP病例粪便标本(2 185份),EV分离阳性276例,未发现脊灰野病毒,分离到疫苗相关脊灰病毒112例,疫苗变异脊灰病毒6例,疫苗相关脊灰病毒与非脊灰肠道病毒(NPEV)混合4例,NPEV 154例。结论湖南省2001~2005年未发现脊灰野病毒,维持了无脊灰状态。但监测发现疫苗变异脊灰病毒6例,必须采取有效措施阻止可能的疫苗衍生脊灰病毒的循环和爆发。

珠江三角洲地区外来儿童与本地儿童脊髓灰质炎抗体水平比较分析

目的了解珠江三角洲的广州、深圳、东莞、佛山4个市流动儿童口服脊髓灰质炎(脊灰)减毒活疫苗(OPV)预防接种现状及影响因素,为制定流动儿童免疫策略提供科学依据。方法对这4个市本地和外来儿童进行了脊灰抗体水平检测,应用Foxpro 5.0建立数据库,SPSS软件进行统计分析。结果共检测1 180名0~6岁儿童的血标本,其中本地儿童595名,脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳性率分别为99.50%、99.16%、98.15%,几何平均滴度(GMT)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分别为1∶217、1∶214、1∶73;外来儿童585名,脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳性率分别为94.53%、98.12%、94.53%,GMTⅠ、Ⅱ、Ⅲ型分别为1∶145、1∶193、1∶58。显示外来儿童和本地儿童的脊灰抗体阳性率和GMT均在较高水平。结论广东省通过OPV常规免疫和强化免疫,已形成对脊灰病毒有效的免疫屏障。但外来儿童的脊灰抗体阳性率和GMT均低于本地儿童,因此应加强对流动人口儿童的免疫规划管理。

接种麻疹减毒活疫苗引起过敏性紫癜1例报告

中国2000～2004年流行性乙型脑炎流行病学特征分析

目的了解中国2000~2004年流行性乙型脑炎(乙脑)流行情况,为乙脑预防控制提供流行病学依据。方法利用法定传染病报告数据进行乙脑描述流行病学分析。结果中国2000~2004年乙脑报告发病率分别为0.948 9/10万、0.770 7/10万、0.654 8/10万、0.582 9/10万、0.402 1/10万,报告病例主要集中在贵州、重庆、四川、河南、云南、陕西省(直辖市);报告病例中90%为<15岁儿童。结论中国2000~2004年乙脑报告发病率逐年下降,表明乙脑预防控制取得了显著成效。

陕西省1960～2004年流行性乙型脑炎流行病学特征分析

目的分析陕西省流行性乙型脑炎(乙脑)的流行病学特征,为制定乙脑预防控制措施提供依据。方法采用Excel软件进行描述流行病学分析。结果陕西省1960~2004年乙脑发病率呈下降趋势;发病季节前移;高发地区为陕西省南部的汉中、安康市;发病者中<15岁占80.68%,发病者多数在农村。结论提高乙脑疫苗接种率,开展乙脑病例监测,在高发地区及农村进行重点控制,是降低陕西省乙脑发病率的必要措施。

一起不明原因脑炎爆发疫情的调查

目的通过对不明原因脑炎病例的现场调查,分析确认疫情的性质和原因。方法通过规范的现场流行病学调查,对收集到的实验室检测、临床表现和流行病学资料进行综合分析。结果2003年5月8日~6月2日,某市“不明原因脑炎”发病34例,罹患率2.03/10万;死亡4例,病死率11.76%。发生不明原因脑炎病例疫情的乡(镇),1~4月应种儿童(1~15岁)流行性乙型脑炎(乙脑)疫苗的接种率仅为21.82%。当地卫生环境较差,蚊虫孳生严重,未开展有效的预防,三带喙库蚊是当地优势蚊种。病例皆急起发热,体温≥38.5℃,伴嗜睡、抽搐、喷射状呕吐等症状。实验室检测患者的脑脊液压力增高,检测的标本数占病例数的67.65%(23/34),标本中乙脑IgM阳性率82%(19/23)。结论这次“不明原因脑炎”疫情最终确认为一起乙脑疫情。疫情发生的主要原因是2003年5月以前乙脑疫苗接种率低。敏感和质量可靠的诊断试剂,对于这次疫情的判定起了重要作用。

中国≤15岁人群乙型病毒性肝炎发病流行病学分析

目的分析不同监测系统报告≤15岁人群乙型病毒性肝炎(乙肝)发病情况,评价免疫规划监测信息管理系统运转工作。方法对比免疫规划监测信息管理系统和法定传染病报告系统乙肝病例报告情况,并对资料进行分析。结果免疫规划监测信息管理系统报告≤15岁人群乙肝发病数远低于法定传染病报告系统,报告人员对乙肝病例定义未完全掌握。结论建立中国乙肝监测系统,对≤15岁人群急性乙肝病例进行监测是非常必要的。

中小学生接种孩尔来福甲型肝炎灭活疫苗安全性观察

出生81天婴儿误种风疹减毒活疫苗1例报告

全国预防接种异常反应监测省级师资培训效果评估

目的评估两期全国预防接种异常反应监测省级师资培训班的培训效果。方法培训前、后采用同一份问卷对学员进行现场考查,同时以测评表评定学员对培训的满意度。结果培训后与知识、技能相关的13个问题中,7个问题的正确率显著提高,但仍有近半数的学员未能掌握预防接种异常反应的分类。>90%的学员认为本次培训的质量好,但培训材料尚需完善、充实。结论采用互动参与式培训模式效果较好,学员的知识、技能、认知态度及应对处理能力有不同程度的提高,对于一些薄弱环节需要在今后的培训中加强。

营口市1999～2004年常规免疫接种率监测评价

目的了解营口市常规免疫接种率监测现状。方法对1999~2004年常规免疫接种率监测结果,采用差值(D)和比值(R)评价方法进行比较分析。结果县(市、区,下同)级报告的及时率和完整性均为100%,1999~2004年口服脊髓灰质炎疫苗、百白破联合疫苗、麻疹疫苗、乙型肝炎疫苗的常规免疫报告接种率均>98%,而估计接种率与报告接种率相差较大。除2001、2002年D值不可信外,其余均为可疑或可信。结论常规免疫监测数据存在偏高,主要与流动儿童的免疫规划管理不完善和部分县的工作薄弱有关。应加强技术培训,做好流动人口预防接种管理,提高报告接种率的可信性。

肠道病毒诊断与分类

介绍肠道病毒(EV)诊断与分类的主要实验室检测方法。传统的病毒培养与血清中和试验方法是金标准,但具有费时、繁琐,且敏感性不高等局限性,而血清型别多样性又限制其血清学检测方法的应用。分子生物学检测技术的发展,为EV的诊断与分类提供了快速、准确的方法,而且能够提供其它方法所无法提供的生物信息。

儿童预防接种监测信息管理系统在疫苗接种率考核中的应用

脊髓灰质炎Ⅰ型野病毒的再次传播以及输入带来的影响(21个国家,2002～2005年)